EDTA抗凝牛血
標(biāo)本要求
1. 血清：
室溫血液自然凝固10-20 分鐘后，離心20 分鐘左右（2000-3000 轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保
存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
2. 血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20 分鐘后，離心20
分鐘左右（2000-3000 轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成應(yīng)再次離心。
3.尿液：
用無菌管收集。離心20 分鐘左右（2000-3000 轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀
形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
4.細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時(shí)，用無菌管收集。離心20 分鐘左右（2000-3000 轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。
5.培養(yǎng)細(xì)胞:
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100 萬/ml 左右。
通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20 分鐘左
右（2000-3000 轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
6.組織標(biāo)本:
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化
后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻
漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20 分鐘左右（2000-3000 轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢
測，其余冷凍備用。
7.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)
行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融
8.不能檢測含NaN3 的樣品，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
EDTA抗凝牛血
人血清說明：
1、不含防腐劑；艾滋病HIV，梅毒TP、乙肝HBV、丙肝HCV，四個(gè)標(biāo)本檢測均為陰性。未滅活，未除菌，不能用于臨床
2、為實(shí)驗(yàn)材料，以及作為動(dòng)物免疫、病理組化封閉、血清IGG制備、細(xì)胞培養(yǎng)、ELisa等免疫實(shí)驗(yàn)中的封閉及保護(hù)劑的使用。
3、血清解凍后有濁度或少量懸浮物，為蛋白聚合體，不會(huì)影響血清的質(zhì)量，如有必要用0.45um濾膜過濾。 |
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